PREPARATION DE L'ACIDE HIPPURIQUE


RETOUR AU SOMMAIRE


L'acide hippurique (acide benzamidoéthanoïque) est obtenu par la réaction d'acylation du groupe amino de la glycine H2N-CH2-COOH  par le chlorure de benzoyle.
Cet acide se trouve dans les urines. Il provient de composés à noyaux aromatiques qui ne peuvent être détruits par l'organisme. Lors d'un bilan hépatique (recherche de cirrhoses, hépatites...) une méthode de recherche consiste à faire ingérer au patient une certaine masse de benzoate de sodium que l'on retrouve dans les urines sous forme d'acide hippurique après un certain laps de temps.

1) Données[1]

Chlorure de benzoyle
M = 140,6 g.mol-1
d = 1,21
Provoque des brûlures, irritant pour la peau, les voies respiratoires.
Très lacrymogène.
Glycine
M = 75,1 g.mol-1
d = 1,59
pK1 (H3N+-CH2-COOH / NH2-CH2-COOH) = 2,3
pK2 (NH2-CH2-COOH / NH2-CH2-COO-) = 9,7
Solution aqueuse de soude à 10 %
d = 1,10
Corrosive pour la peau et les yeux.
NaOH : M =  40,0 g.mol-1
Dichlorométhane
M = 84,9 g.mol-1   d = 1,33
Teb = 39 °C
Nocif par inhalation. Eviter le contact avec la peau.
Acide chlorhydrique concentré :
M = 36,5 g.mol-1      d = 1,18      pureté en masse : 35%
Provoque des brûlures, irritant pour les voies respiratoires.
Acide benzoïque :
Peu soluble dans l'eau, soluble dans le dichlorométhane.
Acide hippurique :
 M = 179,2 g.mol-1
Très peu soluble dans l'eau froide, soluble dans l'eau chaude.
Insoluble dans le dichlorométhane.


2) Mode opératoire :

2-1) Dissolution de la glycine.
·      Équiper un bicol sec de 250 mL d'un réfrigérant à reflux, d'un système d'agitation magnétique et d'une ampoule de coulée isobare.
·      Introduire 60 mL d'une solution aqueuse de soude à 10 % en masse et 5,0 g de glycine. Mettre en route l'agitation afin de dissoudre la glycine. Noter le pH de la solution obtenue (pH1).

2-2) Réaction d'acylation.
·      Sous hotte bien ventilée, introduire avec précaution et avec l'aide d'un entonnoir, 9 mL de chlorure de benzoyle dans l'ampoule de coulée isobare qui sera ensuite immédiatement bouchée (en présence de l'examinateur).
·      Placer l'ampoule sur le ballon bicol et sous vive agitation ajouter lentement (en 15 minutes environ) le chlorure de benzoyle au contenu du ballon.
·      à la fin de l'addition, laisser le mélange réactionnel sous agitation encore 10 minutes

2-3) Hydrolyse acide du milieu réactionnel.
·      Introduire 5 g de glace pilée et ajouter doucement, avec l'ampoule de coulée, 6 mL d'acide chlorhydrique concentré, en agitant.
·      Refroidir dans un bain de glace.
·      Filtrer le précipité sur büchner et le laver avec 40 mL d'eau froide ; essorer au tapon.
·      Récupérer une pointe de spatule du produit pour une analyse chromatographique ultérieure.

2-4) Séparation
L'acide hippurique est contaminé par un peu d'acide benzoïque et par d'autres produits.
·      Placer le précipité dans un ballon de 100 mL surmonté d'un réfrigérant avec 20 mL de dichlorométhane. Porter à ébullition pendant 10 minutes.
·      Après refroidissement lent, filtrer sur büchner. Peser le produit obtenu (soit m1 cette masse)
·       Récupérer le solvant dans une fiole collective sous la hotte.

2-5) Recristallisation
·      Recristalliser dans l'eau environ 5 g de produit brut (soit m2 cette masse). Noter le volume Veau  utilisé
·      Filtrer sur büchner, laver les cristaux avec 20 mL d'eau froide.
·      Peser le produit pur humide obtenu (soit m3 cette masse)
·      Sécher environ 1g de produit (soit m4 cette masse) à l'étuve réglée sur 130 °C jusqu'à masse constante (soit m5 la masse de l'échantillon sec).

2-6) Contrôle de pureté
·      Mesurer la température de fusion du produit obtenu (en présence de l'examinateur).
·      Réaliser une chromatographie sur couche mince :
Eluant fourni : cyclohexane (1) , acétate d'éthyle (1), quelques gouttes d'acide éthanoïque.
Faire trois dépôts sur la plaque :
1. solution d'acide hippurique brut à 1 % dans l'éthanol.
2. solution d'acide hippurique purifié à 1 % dans l'éthanol.
3. solution d'acide benzoïque à 1 % dans l'éthanol (solution fournie).
·      Révéler aux U.V (en présence de l’examinateur).


[1]Les températures d'ébullition sont données sous une pression de 1,0135 bar.


Compte-rendu